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胎牛血清的內(nèi)毒素來源及其對實驗的不良影響

更新時間:2024-09-29  |  點擊率:294

在細胞培養(yǎng)領(lǐng)域,胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)作為一種重要的培養(yǎng)基添加劑,被廣泛用于支持細胞的生長、分裂和增殖。然而,胎牛血清中可能含有的內(nèi)毒素(Endotoxin)一直是科研人員關(guān)注的重點問題。

 

胎牛血清內(nèi)毒素的來源

內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細菌細胞壁外壁層上的結(jié)構(gòu),主要化學成分是脂多糖中的類脂A成分。這些細菌在生存狀態(tài)下并不釋放內(nèi)毒素,但當細菌死亡自溶或粘附在其他細胞上時,內(nèi)毒素才會釋放出來,表現(xiàn)出其毒性。在胎牛血清的生產(chǎn)過程中,盡管會經(jīng)過嚴格的篩選和處理,但難免會有少量的革蘭氏陰性細菌殘留。這些細菌在儲存或使用過程中死亡,從而釋放出內(nèi)毒素,污染血清。

內(nèi)毒素對實驗的不良影響

  1. 細胞毒性:內(nèi)毒素直接參與細胞凋亡過程,對細胞具有顯著的毒性作用。血清中內(nèi)毒素含量越高,對細胞的毒性越大,容易導(dǎo)致細胞提前老化、形態(tài)改變甚至死亡。這對于依賴細胞健康的實驗結(jié)果具有極大的破壞力。

  2. 實驗結(jié)果偏差:內(nèi)毒素能夠激活免疫細胞,誘導(dǎo)促炎細胞因子的釋放,從而干擾細胞的正常生理功能。這不僅會影響細胞的生長和增殖,還會干擾細胞過程如DNA合成和蛋白質(zhì)表達,導(dǎo)致實驗結(jié)果不準確或出現(xiàn)偏差。特別是在基因敲除、細胞轉(zhuǎn)染等精細實驗中,任何微小的干擾都可能對實驗結(jié)果產(chǎn)生重大影響。

  3. 實驗成本增加:由于內(nèi)毒素對細胞的毒性作用,使用含有高內(nèi)毒素的胎牛血清進行實驗時,細胞培養(yǎng)效率低下,實驗結(jié)果不可靠。這迫使研究人員需要反復(fù)進行實驗以驗證數(shù)據(jù),從而增加了實驗時間和成本。

  4. 安全隱患:未經(jīng)檢疫或品質(zhì)不佳的胎牛血清可能攜帶傳染性物質(zhì),對實驗人員的健康構(gòu)成威脅。在實驗過程中,如果操作不當或防護措施不到位,實驗人員有可能接觸到這些有害物質(zhì),引發(fā)健康問題。

應(yīng)對措施

為了減輕內(nèi)毒素對實驗的不良影響,科研人員可以采取選擇低內(nèi)毒素血清的方法:在采購胎牛血清時,應(yīng)選擇經(jīng)過嚴格檢測和認證的低內(nèi)毒素產(chǎn)品。國際上規(guī)定特級胎牛血清的內(nèi)毒素應(yīng)小于10EU/ml,而更高品質(zhì)的產(chǎn)品如Ausbian特級胎牛血清的內(nèi)毒素含量可低至3EU/ml甚至更低。

 

綜上所述,胎牛血清中的內(nèi)毒素來源復(fù)雜且難以避免,但其對實驗的不良影響卻不容忽視??蒲腥藛T應(yīng)高度重視內(nèi)毒素問題,采取有效措施減輕其對實驗的影響,確保實驗結(jié)果的準確性和可靠性。

 


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