近日《動物醫(yī)學(xué)進展》上有一篇文章《支原體對細(xì)胞培養(yǎng)污染的研究概況》（動物醫(yī)學(xué)進展，2013,34：112-117）談到 “支原體污染細(xì)胞的嚴(yán)重性”，里面提到：

　　支原體早發(fā)現(xiàn)于1898年，1956年Robinson等*從細(xì)胞培養(yǎng)物中分離出支原體，之后國內(nèi)外關(guān)于支原體污染細(xì)胞的報道屢見不鮮。它廣泛存在于自然界中，有100余種，污染細(xì)胞chang見的支原體包括發(fā)酵支原體（ M.fementans）、豬鼻支原體（M.hyorhinis）、口腔支原體（M.orale）、精氨酸支原體（M.arginina）、梨支原體（M.pirum）、唾液支原體（M.salivarium）和人型支原體（M.hominis）。

支原體通常附著在細(xì)胞的表面，并影響其宿主細(xì)胞的生理、遺傳等多方面的正常功能，用這些污染后貌似正常的細(xì)胞做實驗或生產(chǎn)，將會嚴(yán)重影響結(jié)果。

A圖為正常的牛源細(xì)胞系MDBK。B圖為受到支原體污染的MDBK細(xì)胞。

　　1、對細(xì)胞生長繁殖和形態(tài)的影響

　　細(xì)胞培養(yǎng)物被支原體污染后生長減慢，且產(chǎn)生細(xì)胞病變，表現(xiàn)為細(xì)胞體積增大，碎片增多，在細(xì)胞質(zhì)中產(chǎn)生一些顆粒；細(xì)胞內(nèi)病毒繁殖受阻，使細(xì)胞形成空斑。光鏡下形成不正常密度生長的單層，貼壁細(xì)胞形成“流沙樣”脫落、裂解。某些支原體可在侵入細(xì)胞８小時使線粒體膨脹，繼而被破壞，細(xì)胞核萎縮呈空泡化，細(xì)胞微管解聚，培養(yǎng)瓶中細(xì)胞與細(xì)胞間隙出現(xiàn)膜狀沉積，細(xì)胞無法傳代，甚至整個細(xì)胞群體溶解。

　　2、對細(xì)胞代謝和功能的影響

　　有些被污染后的細(xì)胞，雖形態(tài)上變化不明顯，但培養(yǎng)液pH變化較大，更換培養(yǎng)液后幾小時就變酸，培養(yǎng)基中的必需氨基酸被消耗掉，改變細(xì)胞代謝。

　　支原體吸附在細(xì)胞表面，破壞細(xì)胞膜的完整性，影響細(xì)胞信號傳遞；消耗細(xì)胞的核苷庫，引起細(xì)胞染色體異常；發(fā)酵型支原體能迅速降解簡單糖類，代謝產(chǎn)生的酸能改變細(xì)胞的功能；利用精氨酸的支原體則發(fā)生精氨酸效應(yīng)，從而影響蛋白質(zhì)和核酸的合成、導(dǎo)致細(xì)胞的分裂和生長受阻；

支原體還引起細(xì)胞酶譜改變；由于支原體對細(xì)胞膜的吸附，干擾膜受體的功能，改變信號傳遞，破壞膜的完整性。在單克隆抗體制備中，骨髓瘤或雜交瘤細(xì)胞因支原體的污染而導(dǎo)致融合失敗或抗體分泌能力下降以至喪失。

　　3、引起染色體異常

　　改變?nèi)旧w組型，通?？蓪?dǎo)致細(xì)胞染色體斷裂、數(shù)目減少，出現(xiàn)雙著絲點染色體、環(huán)狀染色體等。

　　4、對免疫細(xì)胞產(chǎn)量的影響

　　支原體能影響巨噬細(xì)胞的活性，抑制干擾素的合成和降低其活性，加大了繼發(fā)感染其他細(xì)菌和病毒的幾率，同時，通過植物血凝素干擾淋巴細(xì)胞的刺激、分化。

　　因此，應(yīng)定期對你養(yǎng)的細(xì)胞進行支原體的監(jiān)測。支原體污染早期癥狀較清，肉眼看不出來。別讓支原體毀了你的實驗，浪費了你的時間。要想早期預(yù)防支原體，請選用一些支原體祛除劑（如ZellShield ）。要想監(jiān)測是否有支原體，可選用一些支原體PCR檢測試劑盒（如 “VenorGeM支原體檢測試劑盒（一步法）），或可咨詢了解具體的預(yù)防方案。

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