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細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),鏡下有小黑點(diǎn),怎么解決?

更新時(shí)間:2020-11-12  |  點(diǎn)擊率:944

有些實(shí)驗(yàn)人員報(bào)告,細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)在鏡下發(fā)現(xiàn)有小黑點(diǎn)。

 

這是有污染嗎?應(yīng)如何處理?

 

一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,可采取下列步驟:

 

首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,

 

然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。

如果細(xì)胞被污染,微生物則會(huì)大量繁殖,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。

 

如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒(méi)有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):

 

(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)老,破碎的細(xì)胞殘骸;

 

(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;

 

(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);

 

(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格??蓱?yīng)用離心、過(guò)濾的方法去除這些黑點(diǎn);

 

(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除。

 

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